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抗菌性能测试(定性法 / 平行划线法)

Antibacterial Activity Test (Qualitative / Parallel Streak)
抗菌性能测试(定性法 / 平行划线法)
标准AATCC 147、GB/T 20944.1(琼脂平皿扩散法)
常用菌种金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌
培养条件37 ℃,18~24 h
观察指标抑菌带宽度、试样下方菌落生长情况
特点快速、直观,但不能给出抑菌率数值
在琼脂平板上平行划线接种,把试样横放在菌线上培养,观察试样周围是否出现抑菌带,是快速筛选抗菌整理的方法,只定性不定量。

试验原理

在营养琼脂平板表面用接种环平行划 5 条菌线,把试样条垂直于菌线贴在琼脂表面,培养 18~24 h。

若试样含可扩散的抗菌剂,会在试样周围形成无菌生长的透明区(抑菌带);若抗菌剂不扩散,则只在试样下方及接触区域无菌生长。

观察抑菌带宽度与试样下方菌落的生长情况,作出定性判断。

操作步骤

  • 制备营养琼脂平板,表面干燥(避免冷凝水)。
  • 用接种环蘸取菌液,在平板上平行划 5 条线(间距约 10 mm),不得划破琼脂。
  • 将试样(25 mm × 50 mm)横向压在各条菌线上,确保与琼脂充分接触。
  • 37 ℃ 培养 18~24 h。
  • 取出观察:用游标卡尺测量试样两侧的抑菌带宽度(mm),并在显微镜或放大镜下检查试样下方的菌落。

结果判读

  • 有抑菌带且试样下方无菌生长:抗菌效果好(扩散型抗菌剂)。
  • 试样下方无菌生长但无抑菌带:抗菌效果好(非扩散型/接触型抗菌剂,如有机硅季铵盐、银系)。
  • 试样下方有少量菌落:抗菌效果有限。
  • 试样下方菌落正常生长:无效。
  • 本方法不能给出"抑菌率 99%"之类的定量结论,宣传与出货判定必须用定量法(GB/T 20944.2 / AATCC 100)。

注意事项

  • 平板表面必须干燥,冷凝水会造成菌液流动、结果混乱。
  • 接种量要适中,菌线太密或太稀都会影响判断。
  • 试样必须灭菌后再测试,但要注意高温可能破坏不耐热的抗菌剂(可改用环氧乙烷或紫外灭菌)。
  • 扩散型抗菌剂(如某些季铵盐)会形成很宽的抑菌带,这并不代表耐洗性好,容易误导。
  • 每次试验必须做空白对照(未处理织物)与阳性对照(已知抗菌织物)。

相关标准

  • AATCC 147—2016 Antibacterial Activity Assessment of Textile Materials: Parallel Streak Method
  • GB/T 20944.1—2007《纺织品 抗菌性能的评价 第1部分:琼脂平皿扩散法》
  • ISO 20645:2004 琼脂扩散平板试验
  • JIS L 1902(定性部分)

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